008101230s2010    ggk       d      a  korIA
 056  ▼a520.7▼24
 090  ▼a520.7▼b농239ㄴ
 110  ▼a농림수산식품부▼b수산개발과
 24500▼a나노-효소기술을 이용한 기능성 수산물의 한방소재화 및 실용화 기술개발▼d농림수산식품부 수산개발과▼e(주)서진바이오텍 [공편]
 260  ▼a[수원]▼b서진바이오텍▼c2010
 300  ▼a[488] p.▼b삽도▼c전자파일
 44000▼a최종연구보고서
 50000▼a연구책임자 : 김학주
 50010▼a원문파일(pdf)로만 열람가능
 50010▼a책자는 해양수산부 자료실로 이관한 자료임
 50010▼a발간등록번호 : 11-1541000-000580-01
 504  ▼a참고문헌 : p.311-315
 7001 ▼a김학주
 710  ▼a서진바이오텍
 710  ▼a농림부
 710  ▼a농수산부
 710  ▼a농림수산부
 710  ▼a농림축산식품부
 856  ▼uhttp://library.mafra.go.kr/skyblueimage/eb01447
 9501 ▼a비매품

제1장  연구개발과제의 개요 = 9
 제1절  연구개발의 목적 = 9
 제2절  연구개발의 필요성 = 9
  1. 패각류에 대한 이용현황 = 9
   가. 한약소재로서 이용 = 9
   나. 식품 칼슘제로서의 이용 = 9
   다. 비료로 이용 = 11
   라. 수 처리제 = 11
   마. 생체재료로 이용 = 13
   바. 기타 = 13
  2. 패각류에 대한 국내·외 산업적 활용과 문제점 = 13
  3. 앞으로 전망 = 14
  4. 연구개발의 범위 = 15
   가. 최종 목표 = 15
   나. 연차별 연구개발목표와 내용 = 15

제2장  국내외 기술 개발 현황 = 17
 제1절  국내·외 관련분야에 대한 기술개발 현황 = 17
 제2절  연구결과가 국내·외 기술현황에서 차지하는 위치 = 20
  1. 개발기술에 대한 평가 = 20
  2. 원료 및 제조시설 확보방안 = 21
   가. 자원조달의 특성 = 21
   나. 관련법령 또는 정부의 규제 = 21
   다. 패각의 활용 가능한 분야별 국내·외 시장규모 분석 및 전망 = 22
    (1) 탄산칼슘의 국내시장규모 = 22
    (2) 칼슘제 시장규모 = 22
     (가) 건강 기능성식품의 세계시장 규모 = 22
     (나) 국내 시장 규모 = 23
    (3) 항염증제 시장규모 = 23
    (4) Bioceramic 시장규모 = 24

제3장  연구개발 수행 내용 및 결과 = 25
 제1절  연차별 이론적 실험적 접근방법 = 25
 제2절  연구방법 = 35
  1. 패각 가공처리 기술개발 = 35
   가. 시료수집 = 35
   나. 시료 처리 = 36
   다. 가공분말의 제조 = 36
    (1) 일반분쇄 분말 제조 = 36
    (2) 초미세분말 제조 = 36
    (3) 나노분말 제조 = 37
   라. 패각 분말에 대한 성분분석 = 39
    (1) 수분 정량 = 39
    (2) 조단백질 정량 = 40
    (3) 조지방 정량 = 41
    (4) 조회분 정량 = 42
    (5) 탄수화물 정량 = 43
    (6) 무기질 정량 = 43
    (7) 지방산과 지용성비타민의 정량 = 45
   마. 패각 분말에 대한 물리화학적 특성분석 = 50
    (1) 표면장력의 측정 = 50
    (2) pH에 대한 표면장력의 변화 = 50
    (3) 계면장력 측정 = 50
    (4) HLB (Hydrophilic Lipophilic Balance) value = 50
    (5) 유화활성 및 유화 안정성 = 50
    (6) 온도 및 열 안정성 = 51
  2. 패각 추출물의 생리활성물질 탐색 = 52
   가. 패각추출물(Crude conchiolin)의 추출 및 정제 = 52
    (1) Crude conchiolin의 추출 = 52
    (2) Conchiolin 정제 = 52
    (3) 단백질 정량분석 = 57
    (4) 당 정량분석 = 57
    (5) TLC(Thin layer chromatography) 분석 = 59
    (6) SDS-PAGE(SDS- polyacrylamide gel electrophoresis) = 59
   나. 패각추출물(Crude conchiolin)에 대한 생리활성분석 = 59
    (1) 항산화(DPPH method) = 59
    (2) 항염증실험(COX-1, COX-2 저해활성 측정) = 60
    (3) NO 생성 저해능 측정 = 60
    (4) 세포독성 측정(MTT assay) = 61
    (5) 미백효과(Tyrosinase inhibition assay) = 61
    (6) Collagenase 저해 활성 측정(주름관련 실험) = 62
    (7) Linoleic acid 자동산화 억제활성 측정 = 62
    (8) 항균 및 항곰팡 활성 측정 (Antimicrobial and Antifungal activity) = 62
    (9) 용혈활성측정 = 63
    (10) 근육수축활성 측정 = 63
    (11) Raw264.7 cell에서 가공원료추출물(Crude conchiolin)의 세포독성 및 항염증 활성측정 = 63
     (가) 세포배양 = 63
     (나) 세포 생존율 측정 = 64
     (다) NO 생성량 측정 = 64
     (라) Immunoblot analysis = 64
     (마) Cytokine의 측정 = 64
  3. 전 임상 동물실험 = 65
   가. Rat에서 가공원료추출물(crude conchiolin)의 독성측정 = 65
    (1) 체중측정 = 65
    (2) GOT(Glutamic oxaloacetic transaminase), GPT(Glutamic pyruvic transaminase), LDH(Lactate dehydrogenase) 및 BUN(Blood urea nitrogen) 측정 = 65
   나. DNCB로 유도된 mouse의 접촉성 피부염에 미치는 영향 = 65
    (1)  실험동물의 사육 = 65
    (2) 귀부종 유발 및 귀두께 측정 = 65
    (3) 혈액의 채취 = 66
    (4) 실험동물의 희생 및 부종유발 귀의 채취 = 66
    (5) Immunoglobulin 측정 = 66
    (6) Cytokine 측정 = 67
  4. 효소 가수 분해법을 이용한 conchiolin peptide 제조 = 67
   가. 수용성콘키올린의 추출 및 정제 = 67
   나. 분리 정제 및 구조분석 = 67
    (1) 아미노산 분석 = 67
    (2) 분자량 측정 = 68
   다. 효소가수분해에 의한 펩타이드의 제조 = 69
  5. 굴 패각을 이용한 수용성칼슘의 제조 = 70
  6. 대량분리정제 기술개발과 응용제품의 개발 = 70
   가. 저비용 고효율의 대량분리정제법 개발 = 70
   나. 산업분야별 응용제품의 개발 및 평가 = 70
    (1) 식품소재 = 70
    (2) 화장품소재 = 70
    (3) 한방제품개발 = 70
     (가) 한방 피부외용제 개발 = 70
     (나) 제품의 종류 = 71
    (4) 내과치료처방개발 = 72
  7. 생산실용화 기술개발 = 73
   가. 대량생산공정기술개발 및 경제성 검토 = 73
   나. 제품에 대한 시장분석 및 산업화 전략 등 마케팅 방향연구 = 73
  8. 임상실험 = 73
   가. 피부 임상실험 프로토콜의 개발 = 73
   나. 여드름 임상실험 = 73
   다. 아토피 임상실험 = 73
   라. 임상실험 protocol 1 = 74
   마. 임상실험 protocol 2 = 108
   바. 임상실험 protocol 3 = 131
 제3절. 연구결과 = 140
  1. 패각가공처리 기술개발 = 140
   가. 시료 채취 및 처리결과 = 140
   나. 가공분말의 제조 = 140
    (1) 초미세 분말에 대한 입도분석결과 = 145
    (2) 나노분말에 대한 입도분석결과 = 145
   다. 가공분말의 성분분석 결과 = 148
    (1) 수분 정량 = 148
    (2) 조단백질 정량 = 148
    (3) 조지방 정량 = 148
    (4) 조회분 정량 = 149
    (5) 탄수화물 정량 = 150
    (6) 패각과 패류(가식부)의 일반성분 비교 = 151
    (7) 무기질 정량 = 152
    (8) 비타민 및 지방산 정량 = 152
    (9) 유기물의 구성성분 분석 = 157
  2. 패각분말의 물성분석결과 = 161
   가. 표면장력 측정 = 161
   나. pH에 대한 표면장력의 변화 = 162
   다. 계면장력 측정 = 163
   라. HLB(Hydrophilic Lipophilic Balance) value = 163
   마. 유화활성 및 유화 안정성 = 164
   바. 온도 및 열 안정성 = 164
   사. TG, DSC 열량분석 = 169
  3. 패각 추출물의 생리활성물질 연구결과 = 170
   가. 패각추출물의 추출 및 정제결과 = 170
    (1) Conchiolin 의 추출 = 170
     (가) Conchiolin 의 추출방법 = 170
     (나) Conchiolin의 수득율 = 170
     (라) Crude Conchiolin 에 대한 생리활성 분석 = 174
      ① 단백질 저해활성(COX, DOPA) = 174
      ② Linoleic acid 자동산화 억제활성 측정 = 182
      ③ 항균 및 항곰팡이 활성 측정 = 183
      ④ 용혈활성측정 = 187
      ⑤ 근육강화활성 측정 = 188
  4. 패각으로부터 Conchiolin의 최적 추출 조건 검토 = 190
   가. Conchiolin 추출용 최적 Buffer의 선정 = 190
   나. 0.1M Citrate buffer와 8.0M Urea buffer로부터 추출된 conchiolin의 단백질, 당 정량 분석 = 191
   다. 선정된 Buffer를 이용하여 각종 패각으로부터 분리한 conchiolin의 생리활성 비교 분석 = 194
    (1) 항염증 활성 측정 (Cyclooxygenase, COX inhibition assay) = 194
    (2) 항산화 활성 측정 (DPPH radical scavenging assay) = 194
   라. 6종류 패각으로부터 분리한 conchiolin의 분자량분석 = 199
   마. Conchiolin의 분리정제 및 생리활성 연구 = 201
    (1) Conchiolin의 정제 = 201
    (2) 항염증 활성 측정 (Cyclooxygenase, COX inhibition assay) = 201
    (3) 항산화 활성 측정 (DPPH radical scavenging assay) = 206
    (4) 미백 활성 측정 (In vitro tyrosinase inhibition assay) = 206
   바. 정제된 conchiolin의 TLC(Thin layer chromatography) 분석 = 209
   사. 정제된 conchiolin의 SDS-PAGE (SDS-polyacrylamide gel electrophoresis) = 212
  5. 대량생산을 위한 Conchiolin의 수율검증 = 214
   가. 굴 패각을 이용한 Conchiolin 수율검증 = 214
  6. Soluble conchiolin의 구조분석 = 217
   가. 굴 패각으로부터 추출한 conchiolin의 분리정제 = 217
   나. 정제된 Conchiolin의 순도 확인 및 분자량 검증 = 218
   다. 정제된 Conchiolin의 아미노산 분석 = 218
   라. 수용성 콘키올린의 구조분석 = 221
  7. 효소가수분해에 의한 펩타이드의 제조 = 222
  8. 상용화된 항염증 제품과 분리한 conchiolin에 대한 활성비교 = 225
   가. 항염증 활성 측정 (Cyclooxygenase, COX inhibition assay) = 225
   나. 항산화 활성 측정 (DPPH radical scavenging assay) = 229
  9. 전 임상 동물실험 = 230
   가. Raw 264.7 cell에서 Crude conchiolin의 세포 독성 및 항염 활성 측정 = 230
   나. SD Rat에서 crude conchiolin의 독성측정 = 230
    (1) 체중측정 = 230
    (2) GOT, GPT, LDH = 230
   다. 굴 패각 유래 conchiolin 과 나노 분말이 DNCB로 유도된 mouse의 접촉성 피부염에 미치는 여향 = 239
    (1) 귀 부종에 미치는 영향 = 239
    (2) 혈청 IgE의 농도에 미치는 영향 = 239
    (3) IL-1β의 농도에 미치는 영향 = 239
    (4) IL-6의 농도에 미치는 영향 = 239
  10. 굴패각을 이용한 수용성칼슘제조 = 245
  1. 대량분리정제 기술개발과 응용제품의 개발 = 246
   가. 대량분리공정개발 및 경제성검토 = 246
    (1) 제조공정 = 246
    (2) 생산공정 설계도(100톤) = 247
    (3) 생산설비단가 = 248
    (4) 제조원가(패각분말 10톤/일 처리기준) = 249
    (5) 국내 경쟁사 제품 및 국외 경쟁사 제품과의 품질, 기술, 가격 비교 = 250
   나. 응용제품개발 = 250
    (1) 굴 패각 유래 conchiolin 함유 한방 아토피 및 여드름 치료용 화장품개발 = 251
     (가) 화장품 베이스 원료의 개발 = 251
     (나) 제품사진 = 251
     (다) 제품화를 위한 아토피치료용 화장품의 처방개발 = 251
      ① 아토피 스킨처방 = 252
      ② 아토피 로션처방 = 253
      ③ 아토피크림 = 254
      ④ 여드름용 제품의 개발 = 255
    (2) 굴 패각 유래 calcium 함유 성장용 청국환의 제조 = 256
    (3) 제품평가 = 257
     (가) 항염증 활성 평가(Cyclooxygenase-2 저해활성, NO 생성 저해능) = 257
      ① Cyclooxygenase-2 저해활성평가 = 257
      ② NO 생성 저해능 평가 = 262
      ③ 세포독성 평가 = 262
      ④ 가공분말 및 기능성 분획물에 대한 독성실험 = 267
    (4) 한방피부과 아토피 처방 protocol = 269
     (가) 한방아토피 입욕제 = 269
     (나) 아토피 치료제의 치료 처방순서 = 269
     (다) 임상사례 = 269
    (5) 내과처방개발 = 271
     (가) 경부임파선 처방 = 271
     (나) 해열처방 = 272
  12. 임상실험(여드름, 아토피) = 273

제4장. 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 = 274

제5장. 연구개발 성과 및 활용계획 = 275

제6장. 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 = 282

제7장. 참고문헌 = 311

별첨 4, 5