008111228s2011    tjka     t MB 000a  korIA
 056  ▼a520.7▼24
 090  ▼a520.7▼b농239ㅎ
 110  ▼a농림수산식품부▼b식품산업정책과
 24500▼a흑삼의 두뇌활성화 기능탐색과 상품화▼d농림수산식품부 식품산업정책과▼e충남대학교 [공편]
 260  ▼a[대전]▼b충남대학교▼c2011
 300  ▼a130 p.▼b삽도▼c30 cm
 44000▼a최종연구보고서
 50000▼a연구책임자: 성창근
 50010▼a발간등록번호 : 11-1541000-001068-01
 504  ▼a참고문헌 : p.126-130
 7001 ▼a성창근
 710  ▼a충남대학교
 710  ▼a농림부
 710  ▼a농수산부
 710  ▼a농림수산부
 710  ▼a농림축산식품부
 856  ▼uhttp://library.mafra.go.kr/skyblueimage/3525
 9501 ▼a비매품

제1장  연구개발과제의 개요 = 15

  제1절  연구개발의 필요성 = 15

    1. 기술적 측면 = 15

    2. 경제 · 산업적 측면 = 15

    3. 사회 · 문화적 측면 = 16

      가. 실버건강제품의 필요성 = 16

      나. 건강 및 기능성 식품에 대한 관심의 증가 = 17

  제2절  연구개발의 목적 = 18

    1. 연구의 목적 및 범위 = 18

      가. 연구의 목적 = 18

      나. 연구의 범위 = 18


제2장  국내외 기술개발 현황 = 19

  제1절  국내외 연구개발 현황 = 19

    1. 국외의 연구개발 현황 = 19

    2. 국내의 연구개발 현황 = 19

    3. 국내 · 외「기억능력 향상」표기 건강기능식품의 예 = 20


제3장  연구개발수행 내용 및 결과 = 21

  제1절  연구수행방법 = 21

    1. 구증구포 흑삼 제조와 HPLC 분석조건 확립 = 21

      가. 구증구포 흑삼의 제조 = 21

      나. 인삼 사포닌 분석 = 21

    2. 새로운 흑삼제조 기술 탐색 = 21

      가. 과일 유기산 침지방법을 이용한 흑삼의 제조 = 21

      나. 추출 조건에 따른 사포닌 함량 비교 = 21

      다. 증숙온도 및 증숙시간에 따른 흑삼의 사포닌 함량 변화 = 21

      라. 염기 용액 침지법을 이용한 흑삼의 제조 = 22

      마. 제조흑삼의 PHAs 안전성 평가 = 22

    3. 흑삼의 항산화 및 Cholinesterase 억제활성 탐색 = 22 

      가. 흑삼의 제조 = 22

      나. 흑삼 엑기스 제조 = 22

      다. 흑삼 엑기스의 항산화 활성 = 22

        (1) DPPH 라디컬 소거 활성 = 22

        (2) SOD 유사 활성 = 23

        (3) 폴리페놀 함량 = 23

      라. Cholinesterase 억제 활성 = 23

    4. 화기삼, 전칠삼을 이용한 흑삼 제조 = 24

      가. 흑삼제조 = 24

      나. 화기흑삼, 전칠흑삼, 고려흑삼의 사포닌측정, 항산화 및 Cholinesterase 억제활성 = 24

    5. 단회투여에 의한 AChE의 억제 효과 = 24

      가. 실험동물 = 24

      나. 뇌조직의 AChE의 억제 효과 = 24

    6. 흑삼의 독성 안전성 평가 = 24

      가. 실험 동물 및 처치 = 24

      나. Hematolgical, biochemical analyses = 25

      다. 뇨 검사 = 25

      라. 간, 신장의 조직검사 = 25

    7. Scopolamine에 의한 치매 동물모델에 대한 흑삼의 기억력 개선 효과 = 25

      가. 인삼추출물 제조 = 25 

      나. Scopolamine을 이용한 치매 동물 유발 = 25

      다. 수동회피실험-Passive avoidance test = 26

      라. 수중미로 실험-Morris water maze = 26

      마. Y-미로 실험 = 27

      바. 뇌조직의 AChE, ChAT, 및 항산화 효소활성 = 27

      사. 뇌조직의 Cholienrgic marker 단백질의 발현 = 27

    8. 인삼 추출물의 장기 섭취가 뇌기능 개선에 미치는 흑삼의 효과 = 28

      가. 실험 동물 = 28

      나. 혈청 분석 = 28

      다. 뇌조직의 AChE, ChAT, 및 항산화 효소활성 = 28

      라. 뇌조직의 Cholienrgic marker, Synaptic plasticity, Nerve growth factor 단백질의 발현 = 28

    9. 노화 흰쥐의 뇌기능 개선에 미치는 흑삼의 효과 탐색 = 28

      가. 실험 동물 = 28

      나. 뇌조직의 AChE, ChAT, 및 황산화 효소활성 = 28

      다. 뇌조직의 Cholienrgic marker, Synaptic plasticity, Nerve growth factor 단백질의 발현 = 29

    10. D-galactose로 손상된 뇌기능 개선에 미치는 흑삼의 효과 = 29

      가. 실험 동물 = 29

      나. 수중 미로 실험 = 29

      다. 혈청과 뇌적출 = 29

      라. RNA 추출과 Microarray analysis = 29

      마. Real time-PCR를 통한 synaptic plasticity 활성 = 29

      바. 뇌조직의 효소 활성 및 지질 과산화물 함량 = 30

    11. 뇌신경세포 생성과 기억력 개선에 미치는 Ginsegnoside Rb₁의 효과 = 30

      가. Ginsenoside Rb₁투여 = 30

      나. Morris water maze test = 30

      다. BrdU protocal = 30

      라. 면역조직화학법 = 30

      마. BrdU positive cell 정량 = 30

    12. 통계처리 = 31

  제2절  연구 수행 결과 = 32

    1. 인삼의 뇌기능 개선 관련자료 수집 및 분석 = 32

      가. 주요 사포닌의 화학적 구조 = 32

      나. 주요 인삼 사포닌의 약리학적 기능과 기전 = 34

      다. Ginseng polysaccharides의 약리학적 기능 = 37

      라. 사포닌 전환 원리 = 37

      마. Ginsenoside biotransformation에 사용되는 미생물과 대사물 = 39

    2. 구증구포 방법에 의한 흑삼 제조 및 HPLC 사포닌 분석조건 확립 = 41

      가. 흑삼제조 = 41

      나. Ginsenoside Rg₃분석을 위한 HPLC 분석 조건 확립 = 41

        (1) TLC 분석을 통한 사포닌 패턴 비교 = 41

          ① 인삼 추출물 제조 = 41

          ② TLC 분석 = 42

          ③ TLC 전개용매 = 42

        (2) Ginsenoside Rg₃의 최적 분석 조건 확립 = 43

      다. 증숙 횟수에 따른 사포닌 함량 변화 = 47

      라. 증숙횟수에 따른 ginsenoside Rg₃함량의 변화 = 50

    3. 새로운 흑삼제조 기술 탐색 = 50

      가. 과일 유기산 침지방법을 이용한 흑삼의 제조 = 50

        (1) 흑삼제조 = 50

        (2) 과일주스 침지에 따른 흑삼의 사포닌 함량 변화 = 50

        (3) 과일주스 침지에 따른 흑삼의 ginsenosied Rg₃함량 비교 = 53

      나. 포도주스 침지를 이용한 흑삼 제조의 최적 조건 탐색 = 53

        (1) 최적온도 조건 탐색 = 53

        (2) 증숙온도 120℃에서의 최적의 증숙시간 탐색 = 56

        (3) 증숙 횟수에 따른 흑삼제조(120℃, 60 min) = 59

      다. 염기용액에 침지하여 제조한 흑삼(121℃, 15 min) = 61

        (1) NaHCO₃용액을 이용한 흑삼 제조 = 61

        (2) 포도주스와 0.4％ Citric acid에 침지 후 흑삼 제조 = 62

      라. 제조 흑삼의 잔류농약 안전성 평가 = 63

    3. 흑삼 추출물의 항산화 및 Cholinesterase 억제 효과 탐색 = 64

      가. 백삼, 홍삼, 흑삼의 사포닌 변화 = 64

      나. 흑삼 추출물의 항산화 활성 = 66

        (1) 총 페놀 함량 = 66

        (2) DPPH 라디컬 소거능과 Xanthine oxidase (XO) 억제활성 = 66

      다. 흑삼 추출물의 Cholinesterase 억제활성 = 67

    4. 화기삼, 전칠삼을 이용한 흑삼제조 = 68

      가. 흑삼제조 = 68

      나. 각 국 인삼(백삼)의 사포닌 분석 = 68

      다. 각 국 흑삼의 사포닌 분석 = 70

      라. 각 국 인삼(백삼, 흑삼)의 항산화 활성 비교 = 72

        (1) 총 페놀 함량 = 72

        (2) DPPH 라디컬 소거활동 = 72  

        (3) Xanthine oxidase 억제활성 = 72

      마. 각 국 인삼의 Cholinesterase 억제활성비교 = 74

        (1) AChE 억제활성 = 74

        (2) BuChE 억제활성 = 74

      바. 흑삼 추출물의 단회 투여에 의한 뇌조직의 AChE 억제 효과 = 76

    5. 흑삼의 급성 독성 안전성 평가 = 76

      가. 실험동물의 체중 및 장기무게 = 76

      나. 혈액학적 분석 = 78

      다. 혈청학적 분석 = 79

      라. 뇨 검사 = 80

      마. 조직학적 분석 = 80

    6. Scopolamine에 의한 치매 동물모델에 대한 흑삼의 기억력 개선 효과 = 81

      가. 시료 인삼 추출물의 사포닌 함량 = 81

      나. Passive avoidane test - 흑삼추출물의 용량별 효과 탐색 = 82

      다. 인삼추출물의 Passive avoidance test 효과 = 82

      라. Morris water maze 실험 = 84

      마. Y-maze 실험 = 85

      바. 뇌조직의 acetylcholinesterase, choline acetycholinesterase 활성 = 86

      사. 뇌조직의 항산화 활성 = 87

      아. Cholinergic marker 발현에 미치는 흑삼의 효과; Western blot = 88

      자. Cholinergic marker 발현에 미치는 흑삼의 효과; RT-PCR = 89

    7. 인삼 추출물의 장기 섭취가 뇌기능 개선에 미치는 흑삼의 효과 탐색 = 90

      가. 체중 및 장기 무게 = 90

      나. 혈청학적 분석 결과 = 91

      다. 뇌조직의 acetylcholinesterase, choline acetyltransferase 활성 = 92

      라. 뇌조직의 항산화 효소 활성에 미치는 효과 = 93

      마. Cholinergic marker protein 발현에 미치는 효과 = 94

      바. GAP-43, SNAP-25, NGF 발현에 미치는 효과 = 95

    8. 노화 흰쥐의 뇌기능 개선에 미치는 흑삼의 효과 탐색 = 96

      가. 수동회피실험 = 96

      나. Comet assay를 통한 혈액 Iymphocyte의 DNA damage = 96

      다. Cholinergic protein 발현에 미치는 효과 = 97

        (1) AChE, ChAT 효소 활성 = 97

        (2) Cholinergic protein-AChE, ChAT, VAChT 단백질 발현 효과 = 98

    9. D-galactose로 유발한 노화 흰쥐의 뇌기능에 미치는 흑삼의 효과 = 100

      가. Morris water maze test = 100

      나. 뇌조직의 항산화 효소 활성 = 100

        (1) 뇌조직의 지질과산화물 형성 = 100

        (2) 항산화 효소 활성 = 100

        (3) Na+-K+-ATPase activity =100 

      다. 뇌조직의 cholinergic enzyme 및 MAO-B 활성 = 103

      라. Real-time PCR를 통한 GAP-43, SNAP-25의 발현 비교 = 104

      마. Microarray 분석결과 = 105

    10. 뇌신경세포 생성과 기억력 개선에 미치는 Ginsegnoside Rb₁의 효과 = 113

      가. Morris water maze test = 113

      나. 해마조직에서 세포증진에 미치는 Rb₁의 효과 = 114

    11. 흑삼을 이용한 건강기능 식품 개발 = 115

      가. 흑삼제품 개발 = 115

      나. 파우치 제품의 사포닌 분석 = 115

      다. 저장 기간 중 파우치 제품의 세균수 측정 = 116

      라. 제품의 관능평가 = 116


제4장  목표달성도 및 관련분야에의 기여도 = 117


제5장  연구개발 성과 및 성과활용 계획 = 120


제6장  연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 = 122


제7장  참고문헌 = 126