008120103s2011    hbka     t LB 000a  korIA
 056  ▼a520.7▼24
 090  ▼a520.7▼b농239ㅂ
 110  ▼a농림수산식품부▼b과학기술정책과
 24500▼a분자다중화 결합 저해를 통한 갈반병 원인독소 톨라신의 독성억제 방안 개발▼d농림수산식품부 과학기술정책과▼e충북대학교 [공편]
 260  ▼a[충북]▼b충북대학교▼c2011
 300  ▼a153 p.▼b삽도▼c30 cm
 44000▼a최종연구보고서
 50000▼a연구책임자: 김영기
 50000▼a발간등록번호 : 11-1541000-001024-01
 504  ▼a참고문헌 : p.149-153
 7001 ▼a김영기
 710  ▼a충북대학교
 710  ▼a농림부
 710  ▼a농수산부
 710  ▼a농림수산부
 710  ▼a농림축산식품부
 856  ▼uhttp://library.mafra.go.kr/skyblueimage/3726
 9501 ▼a비매품

제출문 = 2

요약문 = 4
 1. 제목
 2. 연구개발의 목적
 3. 연구개발 필요성 및 범위
 4. 연구개발 결과
 5. 연구성과 및 성과 활용계획

SUMMARY = 10
CONTENTS = 15
목차 = 19

제1장  연구개발과제의 개요 = 24
 제1절  연구개발의 목적 = 24
 제2절  연구개발의 필요성 및 범위 = 25
  1. 연구개발의 필요성 = 26
  2. 연구개발의 범위 = 26
 
제2장  국내외 기술개발 현황 = 28
 제1절  국외의 기술개발 현황 = 28
 제2절  국내의 기술개발 현황 = 29

제3장  연구개발수행 내용 및 결과 = 30
 제1절  톨라신의 세포독성 및 톨라신 저해제(TIF)의 효과 = 30
  1. 톨라신 저해제(TIF)의 탐구 및 저해효과 검증 = 30
   (1) 갈반병의 특성 및 연구진행 내용 = 30
   (2) 톨라신 저해제 TIF 탐색 및 효과검증 = 31
   (3) TIF 의 톨라신 저해농도 측정 = 33
   (4) TIF의 처리조건에 따른 효과 = 35
   (5) 버섯함몰검정법에 의한 TIF 효과 = 39
   (6) 톨라신 체널에 대한 TIF의 효과 = 40
   (7) Zn²+와 TIF 동시 처리 효과 = 41
   (8) TIF 종류별 혼합에 따른 상승효과 = 42
   (9) 버섯함몰검정법에서의 상승효과 측정 = 44
  2. 톨라신의 용혈활성 특성조사 = 45
   (1) 톨라신의 세포독성 저해제 탐구 = 45
   (2) Ni²+에 의한 톨라신 이온통로 저해효과 = 46
   (3) Ni²+과 Zn²+의 상호작용 = 47
   (4) Ni²+ 효과 발견의 중요성 = 50
  3. 짧은 지방산으로 구성된 인지질에 의한 톨라신의 용혈활성 증가 = 51
   (1) 톨라신의 용혈활성에 대한 지질의 효과 = 51
   (2) 톨라신의 용혈활성에 미치는 DDPE의 농도 효과 = 52
   (3) DDPE의 적혈구와 사전배양에 의한 효과 = 53
   (4) 인지질과 톨라신의 사전배양 효과 = 54
   (5) DDPE와 톨라신의 사전배양 효과 = 55
   (6) DDPE에 의한 톨라신 채널 활성 증가 = 56
  4. 시제품 제작을 위한 TIF의 안정성, 저장성 연구 = 57
   (1) 산소 접촉 유무에 따른 TIF 안정성 = 57
   (2) 보관온도에 따른 TIF의 안정성 실험 = 58
   (3) 햇빛의 조사에 따른 TIF 효과 안정성 = 60
   (4) 항산화제 첨가에 따른 TIF의 안정성 실험 = 61
   (5) TIF 시작품의 조제 = 67
 제2절  갈반병 생물학적 방제를 위한 파아지 효과분석 = 68
  1. 파아지의 분리 및 특성 분석 = 68
   (1) 톨라시를 숙주로 하는 파아지의 분리 = 68
   (2) 파아지의 안정성 및 살균특성 분석 = 69
    ① 파아지의 종류에 따른 용균력의 차이 = 69
    ② 파아지 접종량에 따른 용균효과 측정 = 70
    ③ 파아지의 접종 시간에 따른 용균력 = 71
    ④ 온도변화에 따른 파아지의 용균력 = 72
    ⑤ 파아지에 의한 수주균의 톨라신 독소 생산증가 = 73
    ⑥ 버섯조직함몰검정법에 의한 파아지 효과 검증 = 74
  2. 버섯재배 실험을 통한 파아지 효과검증 및 적용조건 설정 = 76
   (1) 파아지 효과 확인을 위한 갈반병 발병조건 확립 = 76
   (2) 파아지의 갈반병 억제 효과 = 77
   (3) 느타리버섯 균상재배를 통한 파아지 및 TIF 효과 검증 = 78
    ① 느타리버섯 균상재비 시설 = 78
    ② 느타리버섯 균상재배 = 79
    ③ TIF와 파아지 처리를 통한 갈반병 억제 혀과 확인실험 = 80
   (4) Phage therapy를 위한 병원균 특성 분석 = 83
    ① 갈반병 원인 균주의 분석 및 분류 = 84
    ② 갈반병 원인균 분류에 따른 파아지의 분리 및 분류 = 89 
 제3절  In silico 방법을 이용한 TIF 탐색 및 톨라신 채널 구조결정 = 90
  1. In silico docking을 이용한 tolaasin 저해제의 도출 = 90
  2. NMR을 이용한 톨라신과 TIF 결합연구 = 94
  3. 핵자기공명분광법을 이용한 톨라신과 양이온 사이의 결합에 대한 연구 = 100
  4. 톨라신에 의한 형성된 이온채널의 3차구조 결정 = 105
 제4절  갈반병 병원균의 파아지 돌연변이 연구 = 112
  1. 환경시료로부터의 파아지 분리 = 112
  2. 톨라시균 파아지의 순수 분리 및 정제 = 112
  3. 발굴한 파아지의 살상능력 분석 = 113
  4. 발굴한 8종 파아지의 형태분석 = 115
   (1) 고독성 파아지의 유전체 분석 = 118
   (2) 톨라시균 돌연변이 라이브러리 제조 = 119
   (3) 돌연변이 라이브러리로부터 파아지 내성 변이균 스크리닝 = 120
   (4) 돌연변이 라이브러리로부터 독력 감소 변이균 스크리닝 = 122  
   (5) 독력 감소 변이균의 관련 유전자 확인 = 122
   (6) 454 GS FLX를 이용한 유전체 연기서열 결정 = 124   
 제5절  파아지의 유전체 연구 = 125
  1. 고독성 파아지의 용균반 형성과 전자현미경 형태분석 = 125
  2. 파아지의 톨라시균 용균 살상능력 분석 = 126
  3. 선별한 파아지의 톨라시균 세포 용해 활성 분석 = 128
  4. 파아지 ΦPto-bp6g의 유전체 분석 = 130
  5. 파아지 ΦPto-bp6g의 단백질 분석 = 135

제4장  목표달성도 및 관련분야에의 기여도 = 139
 제1절  연구개발목표의 달성도 = 139
 제2절  관련분야의 기술발전에의 기여도 = 142
  1. 활용계획 = 142
  2. 기술적 측면 = 143
  3. 경제, 산업적 측면 = 143
 제3절  산업화를 위한 검토 및 개선점 = 144

제5장  연구개발결과의 활용계획 = 145
 제1절  실용화 · 산업화 계획(기술실시 등) = 145
 제2절  교육 · 지도 · 홍보 등 기술 확산 계획 = 145
 제3절  특허, 품종, 논문 등 지식재산권 확보계획 = 145
  1. 특허등록(또는 출원) = 145
  2. 상품화 = 145
  3. 논문발표 및 준비중 논문 = 145 
   (1) 논문발표 = 146
   (2) 수리된 논문 = 146
   (3) 준비중 또는 투고된 논문 = 146
 제4절  추가연구, 타연구에 활용 계획 = 147
  1. 파아지를 이용한 추가연구 계획 = 147
  2. 파아지의 용균활성 재조합 단백질을 이용한 추가 연구 계획 = 147

제6장  연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 = 148

제7장  참고문헌 = 148