- 자료유형
- 연구용역보고서
- KDC
- 520.7-4
- 청구기호
- 520.7 농239ㅅ
- 단체저자
- 농림수산식품부 식품산업정책과
- 서명/저자
- 새송이버섯 유래 재조합 단백질을 이용한 기능성 식품 개발 / 농림수산식품부 식품산업정책과 ; 조선대학교 산학협력단 [공편]
- 발행사항
- [광주] : 조선대학교 산학협력단, 2011
- 형태사항
- [206] p. : 삽도 ; 30 cm
- 총서명
- 최종연구보고서
- 주기사항
- 연구책임자: 김성준
- 주기사항
- 발간등록번호 : 11-1541000-001057-01
- 서지주기
- 참고문헌 : p.200-206
- 기타저자
- 김성준
- 기타저자
- 조선대학교 산학협력단
- 기타저자
- 농림부
- 기타저자
- 농수산부
- 기타저자
- 농림수산부
- 기타저자
- 농림축산식품부
- 가격
- 비매품
- Control Number
- maf:29092
소장정보
서가번호 | 등록번호 | 청구기호 | 소장처 | 대출가능여부 | 대출정보 | |
---|---|---|---|---|---|---|
0003545 | 용 : 520.7 농239ㅅ v.2011-161 | 농림축산식품부 자료실 | 대출가능 |
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9501 ▼a비매품
제1장 연구개발과제의 개요 = 27
1절. 연구개발의 필요성 = 27
1. 연구개발대상 기술의 경제적 · 산업적 중요성 및 연구개발의 필요성 = 27
가. 재조합 유용단백질소재의 경제적 산업적 중요성 = 27
나. 버섯을 이용한 재조합 유용단백질 생산기술 개발의 필요성(그림2) = 29
2. 관련기술에 대한 연구팀의 선행연구결과 = 31
가. 새송이버섯을 이용한 GUS 유전자발현 연구 = 31
나. 항생제 marker를 이용한 형질전환버섯의 선별 = 32
다. 형질전환버섯의 형질전환 유무검증 = 32
라. 새송이 버섯에서 인체유래 단백질을 생산하기 위한 발현 백터의 구축 = 33
마. 새송이 버섯에서 인체유래 단백질의 발현 = 34
2절. 연구개발의 목표 및 내용 = 35
1. 연구개발의 최종목표 및 성격 = 35
가. 연구개발의 최종목표 = 35
나. 연구개발의 성격 = 35
2. 연차별 연구개발의 목표 및 내용 = 36
제2장 국내외 기술개발 현황 = 39
1절. 세계적 수준 = 39
2절. 국내수준 = 39
3절. 국내·외의 연구현황 = 40
제3장 연구개발수행 내용 및 결과 = 41
1절. 연구범위 및 연구수행 방법 = 41
1. 1차년도(2008년) = 41
2. 2차년도(2009년) = 42
3. 3차년도(2010년) = 43
2절. 연구개발의 추진 전략·방법 및 추진체계 = 44
1. 연구개발의 추진 전략·방법 = 44
가. 제1세부과제 : 유용 재조합단백질 생산 시스템 개발 = 44
나. 제2세부과제 : 버섯 유용재조합 단백질 발현 시스템 개발 = 47
다. 제3세부과제 : 버섯 유용 재조합 단백질 자실체 및 균사체 대향 배양 시스템 개발 = 49
2. 연구개발의 추진체계 = 51
3절. 연구개발결과 = 52
1. 제1세부 과제 : 유용 재조합단백질 생산 시스템 개발(조선대학교) = 52
가. 성장 호르몬(Growht Hormone) = 52
나. 인터루킨32(Interleukin 32, IL-32) = 68
(1) Beta-glucuronidase(GUS) assay = 68
(2) 암 배양과 hygromycine(50 μg/ml) 함유 배지에서 수율 = 70
(3) 형질전환 균사체 Genomic DNA 분리 = 72
(4) 형질전환 균사체 확인 : Southern blot = 74
(5) SDS PAGE = 76
(6) 형질전환 균사체 protein level 발현확인 : Western blot = 78
(7) biological activity of IL-32 = 79
(가) MIP-2 = 79
(나) TNF-alpha = 79
다. hPDGF-BB = 82
(1) PCR = 82
(2) Sequencing = 84
(3) Agrobacterium 형질전환 PCR = 86
(4) 버섯 균사체 오염률과 발생률 = 88
(5) GUS 활성의 조직화학적 분석 = 90
(6) 형질전환 균사체의 유전자 도입 확인 = 92
(7) Total RNA 분리 및 cDNA 합성과 유전자 도입 확인 = 94
(8) 형질전환 균사체의 단백질 분리 및 분석 = 96
(가) 단백질 정량 = 96
(나) Western blot Purification 및 분석 = 97
(9) Fusion Protein Purification 및 분석 = 99
(10) MALDI-TOF mass spectrometry를 이용한 재조합 단백질의 질량분석 = 102
(11) 재조합 단백질의 Bioactivity assay = 104
(12) 형질전환 균사체에서 생산된 자실체의 분석 = 106
(가) PCR analysis = 107
(나) Southern blot analysis = 108
(다) Total RNA analysis = 110
(라) Western blot analysis = 111
라. Secretion signal(a-factor) = 112
2. 제1협동과제 : 버섯 유용재조합 단백질 발현 시스템 개발((주)캐러스) = 130
(1) 버섯 특이적 프로모터 Tag 및 형질전환체 선별 = 130
(2) 형질전환 버섯 게놈 DNA 추출 = 131
(3) TAIL PCR of promoter tag = 131
(4) TAIL PCR 개요 = 133
(5) TAIL PCR 장점 = 133
(6) TAIL PCR 중요한 특성 및 방법 = 133
(7) 특이 프로모터 단편 클로닝 = 136
(8) DNA 염기서열 분석 = 136
(9) 결과 = 136
(가) 버섯 promoter trap vector 제작 = 136
(나) Promoter trap 형질전환체 선별 = 137
(다) Strategies for isolating and cloning sequences flanking T-DNA = 138
(라) Analysis of 5'-end cloning sequences flanking T-DNA = 141
(10) α-factor vector construction = 141
3. 제2협동과제 : 버섯 유용 재조합 단백질 자실체 및 균사체 대량 배양 시스템 개발(전북대학교) = 146
가. 주요 연구내용 및 결과요약 = 146
(1) 서론 = 146
(2) 연구내용(재료 및 방법) = 147
(가) 공시 균주 = 147
(나) 액체 배지의 조제 = 148
(다) 고체 배지의 조제 = 154
(라) Chitin 함량분석 = 154
(마) Ergosterol 함량분석 = 154
(3) 결과 및 고찰 = 155
(가) 균사체 생산 최적배지 조성 = 155
(나) 곡물배지의 Chitin과 Ergosterol 정량에 의한 균체량 측정 = 157
(다) 균사체 및 자실체 건조 회수량 = 159
(4) 요약 = 167
제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 = 169
1절. 연구개발목표의 달성도 및 관련분야의 기술발전에의 기여도 = 169
제5장 연구개발 성과 및 성과활용 계획 = 173
1절. 연구개발 성과 = 173
1. 학술발표 : 한국버섯학회 포스터 발표 = 173
2. 수상 : 한구버섯학회 포스터 발표 우수상 수상 = 175
3. 학술발표 : 일본분자생물학회 포스터 발표 = 176
4. 특허출원 = 178
5. 학위논문 = 190
6. 연구개발결과의 성과 및 활용목표 대비 실적 = 191
(1) 연구성과 목표 = 191
(2) 연구성과 활용 = 191
(3) 논문게재 성과 = 192
(4) 특허 성과 = 196
(5) 인력활용/양성 성과 = 196
(6) 경제사회 파급효과 = 196
7. 구매금액이 3천만원 이상인 기자재 구매현황 = 196
8. 연구비 집행실적 = 197
9. 중요 연구변경 사항 = 197
제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 = 198
1절. 국내외 관련분야 환경변화 = 198
제7장 참고문헌 = 200
1절. 연구개발의 필요성 = 27
1. 연구개발대상 기술의 경제적 · 산업적 중요성 및 연구개발의 필요성 = 27
가. 재조합 유용단백질소재의 경제적 산업적 중요성 = 27
나. 버섯을 이용한 재조합 유용단백질 생산기술 개발의 필요성(그림2) = 29
2. 관련기술에 대한 연구팀의 선행연구결과 = 31
가. 새송이버섯을 이용한 GUS 유전자발현 연구 = 31
나. 항생제 marker를 이용한 형질전환버섯의 선별 = 32
다. 형질전환버섯의 형질전환 유무검증 = 32
라. 새송이 버섯에서 인체유래 단백질을 생산하기 위한 발현 백터의 구축 = 33
마. 새송이 버섯에서 인체유래 단백질의 발현 = 34
2절. 연구개발의 목표 및 내용 = 35
1. 연구개발의 최종목표 및 성격 = 35
가. 연구개발의 최종목표 = 35
나. 연구개발의 성격 = 35
2. 연차별 연구개발의 목표 및 내용 = 36
제2장 국내외 기술개발 현황 = 39
1절. 세계적 수준 = 39
2절. 국내수준 = 39
3절. 국내·외의 연구현황 = 40
제3장 연구개발수행 내용 및 결과 = 41
1절. 연구범위 및 연구수행 방법 = 41
1. 1차년도(2008년) = 41
2. 2차년도(2009년) = 42
3. 3차년도(2010년) = 43
2절. 연구개발의 추진 전략·방법 및 추진체계 = 44
1. 연구개발의 추진 전략·방법 = 44
가. 제1세부과제 : 유용 재조합단백질 생산 시스템 개발 = 44
나. 제2세부과제 : 버섯 유용재조합 단백질 발현 시스템 개발 = 47
다. 제3세부과제 : 버섯 유용 재조합 단백질 자실체 및 균사체 대향 배양 시스템 개발 = 49
2. 연구개발의 추진체계 = 51
3절. 연구개발결과 = 52
1. 제1세부 과제 : 유용 재조합단백질 생산 시스템 개발(조선대학교) = 52
가. 성장 호르몬(Growht Hormone) = 52
나. 인터루킨32(Interleukin 32, IL-32) = 68
(1) Beta-glucuronidase(GUS) assay = 68
(2) 암 배양과 hygromycine(50 μg/ml) 함유 배지에서 수율 = 70
(3) 형질전환 균사체 Genomic DNA 분리 = 72
(4) 형질전환 균사체 확인 : Southern blot = 74
(5) SDS PAGE = 76
(6) 형질전환 균사체 protein level 발현확인 : Western blot = 78
(7) biological activity of IL-32 = 79
(가) MIP-2 = 79
(나) TNF-alpha = 79
다. hPDGF-BB = 82
(1) PCR = 82
(2) Sequencing = 84
(3) Agrobacterium 형질전환 PCR = 86
(4) 버섯 균사체 오염률과 발생률 = 88
(5) GUS 활성의 조직화학적 분석 = 90
(6) 형질전환 균사체의 유전자 도입 확인 = 92
(7) Total RNA 분리 및 cDNA 합성과 유전자 도입 확인 = 94
(8) 형질전환 균사체의 단백질 분리 및 분석 = 96
(가) 단백질 정량 = 96
(나) Western blot Purification 및 분석 = 97
(9) Fusion Protein Purification 및 분석 = 99
(10) MALDI-TOF mass spectrometry를 이용한 재조합 단백질의 질량분석 = 102
(11) 재조합 단백질의 Bioactivity assay = 104
(12) 형질전환 균사체에서 생산된 자실체의 분석 = 106
(가) PCR analysis = 107
(나) Southern blot analysis = 108
(다) Total RNA analysis = 110
(라) Western blot analysis = 111
라. Secretion signal(a-factor) = 112
2. 제1협동과제 : 버섯 유용재조합 단백질 발현 시스템 개발((주)캐러스) = 130
(1) 버섯 특이적 프로모터 Tag 및 형질전환체 선별 = 130
(2) 형질전환 버섯 게놈 DNA 추출 = 131
(3) TAIL PCR of promoter tag = 131
(4) TAIL PCR 개요 = 133
(5) TAIL PCR 장점 = 133
(6) TAIL PCR 중요한 특성 및 방법 = 133
(7) 특이 프로모터 단편 클로닝 = 136
(8) DNA 염기서열 분석 = 136
(9) 결과 = 136
(가) 버섯 promoter trap vector 제작 = 136
(나) Promoter trap 형질전환체 선별 = 137
(다) Strategies for isolating and cloning sequences flanking T-DNA = 138
(라) Analysis of 5'-end cloning sequences flanking T-DNA = 141
(10) α-factor vector construction = 141
3. 제2협동과제 : 버섯 유용 재조합 단백질 자실체 및 균사체 대량 배양 시스템 개발(전북대학교) = 146
가. 주요 연구내용 및 결과요약 = 146
(1) 서론 = 146
(2) 연구내용(재료 및 방법) = 147
(가) 공시 균주 = 147
(나) 액체 배지의 조제 = 148
(다) 고체 배지의 조제 = 154
(라) Chitin 함량분석 = 154
(마) Ergosterol 함량분석 = 154
(3) 결과 및 고찰 = 155
(가) 균사체 생산 최적배지 조성 = 155
(나) 곡물배지의 Chitin과 Ergosterol 정량에 의한 균체량 측정 = 157
(다) 균사체 및 자실체 건조 회수량 = 159
(4) 요약 = 167
제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 = 169
1절. 연구개발목표의 달성도 및 관련분야의 기술발전에의 기여도 = 169
제5장 연구개발 성과 및 성과활용 계획 = 173
1절. 연구개발 성과 = 173
1. 학술발표 : 한국버섯학회 포스터 발표 = 173
2. 수상 : 한구버섯학회 포스터 발표 우수상 수상 = 175
3. 학술발표 : 일본분자생물학회 포스터 발표 = 176
4. 특허출원 = 178
5. 학위논문 = 190
6. 연구개발결과의 성과 및 활용목표 대비 실적 = 191
(1) 연구성과 목표 = 191
(2) 연구성과 활용 = 191
(3) 논문게재 성과 = 192
(4) 특허 성과 = 196
(5) 인력활용/양성 성과 = 196
(6) 경제사회 파급효과 = 196
7. 구매금액이 3천만원 이상인 기자재 구매현황 = 196
8. 연구비 집행실적 = 197
9. 중요 연구변경 사항 = 197
제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 = 198
1절. 국내외 관련분야 환경변화 = 198
제7장 참고문헌 = 200