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서명 : SPF 동물의 생산과 유지 1. 서론 1.1. 개요 = 1-1 1.2. 용어의 정의 = 1-1 1.3. SPF 동물의 역사 = 1-2 1.4. SPF 동물의 생산 및 이용 현황 = 1-4 2. 차폐시설과 관리기법 2.1. 개요 = 2-1 2.2. 차폐시설 = 2-1 2.2.1. 차폐시설의 수준 = 2-1 2.2.2. 차폐시설의 구조 = 2-3 2.2.3. 차폐시설의 설계시 유의사항 = 2-4 2.2.4. 차폐시설의 시공시 유의사항 = 2-6 2.3. 공기조절장치 = 2-6 2.3.1. 공기 여과멸균 기술 = 2-6 2.3.2. 건식 공기조절장치와 습식 공기조절장치 = 2-8 2.4. 무균사육상(Isolator) = 2-10 2.4.1. 실험소동물용 무균사육상 = 2-10 2.4.2. SPF 돼지용 무균사육상 = 2-12 2-5. 무균수술상(Operating hood) = 2-12 2.5.1. 실험소동물용 무균수술상 = 2-13 2.5.2. SPF 돼지용 무균수술상 = 2-13 2.6. 무균운반상 = 2-15 2.6.1. 실험소동물용 무균운반상 = 2-16 2.6.2. SPF 돼지용 무균운반상 = 2-16 2.7. 차폐시설의 살균 및 소독 = 2-16 2.7.1. 살균제의 선정 및 사용 형태 = 2-17 2.7.2. 차폐시설의 살균소독 방법 = 2-18 2.7.3. 살균소독 효과의 판정 = 2-19 2.7.4. 무균사육상의 살균소독 = 2-20 2.7.5. 동물 사육용품의 살균소독 = 2-20 2.7.6. 사료 및 음수의 멸균 = 2-21 2.8. 차폐시설의 운영 및 관리 = 2-22 2.8.1. 준비 작업 = 2-23 (1) 준비실의 입실 = 2-23 (2) 사육용품의 세척 = 2-23 (3) 사료의 준비 = 2-24 2.8.2. 사육용품의 barrier 내 반입 = 2-25 (1) Cage와 깔짚 = 2-25 (2) 음수와 급수병 = 2-25 (3) 사료 = 2-26 (4) 작업용 의류 = 2-26 (5) 기타 사육기재류 = 2-26 2.8.3. SPF 동물의 barrier 내 반입 = 2-27 (1) 무균수술상에서 barrier 내로의 반입 = 2-27 (2) Isolator에서 barrier 내로의 반입 = 2-28 (3) 외부에서 도입한 SPF 동물의 barrier 내 반입 = 2-28 2.8.4. Barrier 구역의 관리 = 2-29 (1) 입실순서 = 2-29 (2) 동물의 관리 = 2-29 (3) 이상행동, cage 이탈 동물 및 사체의 처리 = 2-31 (4) 청소 및 소독 = 2-31 (5) 퇴실순서 = 2-31 (6) Barrier 내 반출 물품의 처리 = 2-32 2.8.5. Isolator의 관리 = 2-32 2.8.6. 계통 유지용 종축의 기록 = 2-34 3. SPF mouse 생산기법 3.1. 개요 = 3-1 3.2. Germfree mouse 생산기법 = 3-1 3.2.1. 실험 재료 = 3-1 (1) 공시 동물 = 3-1 (2) 필요 기구 및 기자재 = 3-2 3.2.2. 준비절차 = 3-2 (1) 자궁절단 수술용 동물의 준비 = 3-2 (2) 수술 준비 = 3-3 3.2.3. 자궁절단 수술 = 3-4 (1) 수술축의 안락사 = 3-4 (2) 자궁절단 수술 = 3-5 (3) 자궁 절개 및 태자의 적출 = 3-6 (4) 미생물 감염 유무의 확인 = 3-8 3.2.4. 인공 포유 = 3-8 (1) 실험 재료 및 기자재 = 3-8 (2) 랫드 모유의 채취 = 3-9 (3) 마우스용 무균 인공유의 제조 = 3-9 (4) 인공유 급여 = 3-10 (5) 인공유 급여 간격 및 급여량 = 3-12 (6) 미생물 감염 유무의 확인 = 3-12 3.2.5. 무균동물 생산 결과의 판정 = 3-12 3.3. Foster nursing에 의한 SPF mouse 생산 = 3-13 3.3.1. 실험 재료 = 3-13 (1) 공시 동물 = 3-13 (2) 실험 기자재 = 3-13 3.3.2. 대리모의 준비 = 3-13 (1) 동물의 선발 = 3-13 (2) 자연 교미의 유도 = 3-14 (3) 수술 대상축의 준비 = 3-14 3.3.3. 대리포유 방법 = 3-14 3.3.4. 대리모 포유 결과의 판정 = 3-16 3.4. 수정란의 동결보존과 수정란이식에 의한 SPF mouse 생산 = 3-16 3.4.1. 실험재료 = 3-17 (1) 공시 동물 = 3-17 (2) 실험 재료 및 기구 = 3-17 3.4.2. 수정란의 채란방법 = 3-19 (1) 채란을 위한 동물의 관리 = 3-19 (2) 과배란을 위한 성선 자극 호르몬의 준비 = 3-20 (3) 수정란 공여 마우스의 과배란 처리 = 3-20 (4) 수정란의 회수 = 3-22 3.4.3. 수정란의 동결방법 = 3-24 (1) 완만동결법 = 3-24 (2) 초급속동결법 = 3-26 (3) 초자화 동결법 = 3-27 (4) 동결된 수정란의 보존 = 3-28 (5) 동결 수정란의 융해 = 3-28 (6) 체외배양 = 3-29 3.4.4. 수정란 이식에 의한 SPF mouse의 생산 = 3-29 (1) 정관절제 마우스의 준비 = 3-30 (2) 위임신 대리모의 준비 = 3-31 (3) 수정란이식 = 3-31 3.4.5. 수정란 이식에 의한 자축생산 결과의 판정 = 3-34 4. 실험동물의 미생물 검색기법 4.1. 개요 = 4-1 4.2. 검체수의 결정 = 4-11 4.3. 세균성 질병의 모니터링 = 4-13 4.3.1. 개요 = 4-13 4.3.2. 주요 세균성 질병 = 4-16 (1) 폐렴구균증 = 4-16 (2) 포도상구균 감염증 = 4-19 (3) 전염성 마우스 결장 비후증 = 4-23 (4) 녹농균증 = 4-28 (5) Salmonella 감염증 = 4-33 (6) 파스튜렐라 폐렴 = 4-37 (7) 기관지 패혈증 = 4-40 (8) 쥐 코리네균증 = 4-44 (9) Tyzzer 병 = 4-49 (10) 폐 마이코플라즈마병 = 4-51 4.3.3. 세균 분리동정에 의한 검색 = 4-57 (1) 검사재료의 취급 = 4-57 (2) 배양시료의 채취 = 4-58 (3) 배지의 선택 = 4-60 4.3.4. 배지의 특성 및 제조방법 = 4-62 (1) Blood agar = 4-62 (2) MacConkey agar = 4-63 (3) Eosin methylene blue(EMB) agar = 4-64 (4) Salmonella, Shigella(S. S) agar = 4-64 (5) Xylose lysine desoxycholate(XLD) agar = 4-65 (6) Hektoen enteric(HE) agar = 4-66 (7) Pseudomonas isolation agar(PIA) = 4-67 4.3.5. 배양결과의 판독과 기록 = 4-68 (1) 집락의 성상 기록 = 4-68 (2) 균체의 성상 기록 = 4-70 (3) 그람 염색(Gram stain) = 4-72 (4) 특수 염색 = 4-72 (5) 대사작용에 근거한 가동정 = 4-75 (6) 생화학적 성상 시험 = 4-77 4.3.6. 간이 킷트를 이용한 세균 동정법 = 4-86 (1) Staphyloslide test = 4-86 (2) Slidex Pneumo-kit = 4-87 (3) MUCAP test = 4-88 4.3.7. 혈청학적 검사에 의한 검색법 = 4-89 (1) 개요 = 4-89 (2) 혈청의 채취 = 4-89 (3) 혈청 응집반응 = 4-90 (4) 효소면역측정법 = 4-93 4.4. 바이러스성 질병의 모니터링 = 4-99 4.4.1. 개요 = 4-99 4.4.2. 실험동물의 바이러스성 질병 = 4-103 (1) 마우스 간염 바이러스증 = 4-103 (2) 센다이 바이러스병 = 4-108 4.4.3. 바이러스성 질병의 검색 = 4-112 4.5. 원충성질병의 모니터링 = 4-112 4.5.1. 개요 = 4-112 4.5.2. 기생충성 질병의 개요 = 4-114 (1) 쥐 편모충증 = 4-114 (2) 맹장요충 감염증 = 4-117 (3) 쥐 람블 편모충증 = 4-121 4.5.3. 기생충성 질병의 검색 = 4-123 (1) Spironucleus 및 Giardia의 영양체 검출법 = 4-123 (2) Spironucleus 및 Giardia의 충란 검출법 = 4-125 (3) Syphacia sp.의 충란 검사법 = 4-126 (4) A. tetraptera의 검사법 = 4-127 4.5.4. 사육 및 사양 환경의 미생물 검색 = 4-129 (1) 낙하세균검사 = 4-129 (2) 사육환경내 미생물 검사 = 4-130 (3) 사료 및 물에 대한 미생물 검사 = 4-130 5. 실험동물의 유전적 검색기법 5.1. 개요 = 5-1 5.2. 생화학적 표지자 이용 유전적 모니터링 = 5-2 5.3. 검색시료의 채취 = 5-3 5.3.1. 혈액 시료 = 5-3 (1) 시약 = 5-3 (2) 기구 및 장치 = 5-3 (3) 처리 방법 = 5-3 5.3.2. 뇨(尿)의 채취 = 5-4 (1) 기구 및 장치 = 5-4 (2) 처리 방법 = 5-4 5.3.3. 신장 및 기타 조직 시료의 채취 = 5-4 (1) 기구 및 장치 = 5-4 (2) 처리 방법 = 5-4 5.3.4. 실험 시 주의사항 = 5-5 5.4. Cellulose acetate 전기영동법 = 5-5 5.4.1. 기기 및 재료 = 5-5 (1) 전기영동장치 = 5-5 (2) 완충액의 제조 = 5-5 (3) 효소활성염색에 사용되는 시약 = 5-8 5.4.2. 전기영동방법 = 5-9 (1) Cellulose acetate membrane 전기영동 = 5-9 (2) Cellulose acetate plate 전기영동 = 5-10 5.4.3. 결과 판독 = 5-10 5.5. 표지자별 세부 실험방법 = 5-14 (1) Kidney Ctalase-2 = 5-14 (2) Esterase-1 = 5-15 (3) Esterase-2 = 5-16 (4) Esterase-3 = 5-16 (5) Esterase-10 = 5-17 (6) Glucose-6-phosphate dehydrogenase-1 = 5-18 (7) Glucose phosphate isomerase-1 = 5-19 (8) Isocitrate dehydrogenase-1 = 5-20 (9) Lactate dehydrogenase regulator = 5-21 (10) Malic enzyme supernatant = 5-22 (11) Phosphoglucomutase = 5-23 (12) Peptidase-3 = 5-24 (13) Alkaline phosphatase-1 = 5-25 (14) Carbonic anhydrase-2 = 5-26 (15) Hemoglobin beta-chain = 5-27 (16) Major urinary protein = 5-28 (17) Transferrin = 5-28 5.6. 결론 = 5-29 6. SPF 돼지 생산기법 6.1. 개요 = 6-1 6.2. SPF 돼지 생산 기법 = 6-2 6.2.1. 실험 재료 = 6-2 (1) 공시 동물 = 6-2 (2) 필요 기구 및 기자재 = 6-2 6.2.2. 준비 절차 = 6-2 (1) 수술용 동물의 준비 = 6-2 (2) 수술 준비 = 6-3 6.2.3. 자궁절단 수술 = 6-4 (1) 수술축의 소독 및 마취 = 6-4 (2) 자궁절단 수술 = 6-4 (3) 자궁절개 및 태자적출 = 6-5 (4) 미생물 감염유무의 확인 = 6-7 6.2.4. 제왕절개 수술 = 6-7 (1) 수술축의 소독 및 마취 = 6-7 (2) 제왕절개 수술 = 6-8 (3) 미생물 감염 유무의 확인 = 6-10 6.3. 인공포유 = 6-10 6.3.1. 인공유 제조 = 6-11 (1) 인공유의 배합 및 조성 = 6-11 (2) 인공유의 멸균 방법 = 6-12 6.3.2. 인공유 급여 방법 = 6-12 (1) 인공포육 준비 = 6-12 (2) 인공유의 급여 = 6-12 (3) 인공포유 중의 관리 = 6-14 6.4. SPF 돼지의 산업적 이용 = 6-15 6.4.1. 축산목적의 SPF 돼지 = 6-15 6.4.2. SPF 돼지의 이용 = 6-16 6.4.3. SPF 양돈장 관리 기법 = 6-17 (1) SPF 돼지의 환경 관리 = 6-17 (2) SPF 돈군의 구분 = 6-18 (3) SPF 양돈장의 구비 조건 = 6-18 (4) 농장의 경계 구분 = 6-19 (5) 농장의 환경 규제 = 6-20 (6) 농장의 관리 규제 = 6-21 (7) SPF 돼지의 사양관리 = 6-22 (8) SPF 양돈장의 소독 = 6-22 (9) SPF 돼지의 질병관리 = 6-23 (10) SPF 돼지의 검정 = 6-23 (11) SPF 돼지의 인정 및 판매 금지 = 6-25 7. SPF 돼지의 질병검색 7.1. 개요 = 7-1 7.2. 임상증상 관찰 = 7-1 7.3. 바이러스성 질병의 검색 = 7-2 7.4. 세균성 질병의 검색 = 7-3 7.4.1. 비갑개 지수 = 7-3 7.4.2. 폐렴병변 검사 = 7-6 (1) 폐병변율 검사 = 7-6 (2) 병변의 원인체 감별 = 7-7 7.4.3. 세균 분리동정 = 7-8 (1) 병원성대장균(Hemolytic E. Coli) = 7-8 (2) 연쇄상구균 (Streptococcus suis type 2) = 7-8 7.4.4. 옴(Papular Dermititis, Sarcoptic mange) = 7-8 참고문헌 = 8-1 |