목차정보
서명 : 돼지의 생산성 제고를 위한 생명공학기술의 개발연구 Summary = 5 Ⅰ. 서언 = 13 Ⅱ. 연구사 = 18 Ⅲ. 재료 및 방법 = 21 1. 제1세부과제 : 수정란의 외래유전자 도입과 발현 = 21 가. 공시동물 및 배양액 = 21 나. 수정란 미세주입용 선상 DNA 작성 및 미세주입 = 21 다. 외래유전자가 주입된 수정란의 이식 및 형질전환 생쥐의 생산 = 21 라. 외래유전자의 발현 확인 및 검정 = 22 마. 돼지 난자의 Microfilament와 cortical granule 세포학적 평가 = 22 2. 제2세부과제 : Transgenic 수정란의 생산 및 이용효율 제고 = 22 가. 난포란의 회수 및 체외 성숙 = 22 나. 정자의 수정능획득과 체외수정 = 23 다. 수정란의 수정 여부 조사 = 23 라. 수정란의 조작과 DNA 미세주입 = 23 마. 체외수정란의 난포란의 체외발달 = 24 바. X-gal 염색 = 24 사. 전자현미경 관찰 = 24 아. 배양조건 = 24 자. 통계처리 = 24 3. 제3세부과제 : 수정란이식 및 고능력 종돈 생산 = 25 가. 공란돈의 과배란처리, 수란돈의 발정 동기화 및 수정란 채취 = 25 나. 돼지수정란의 외과적 이식 = 25 Ⅳ. 결과 및 고찰 = 26 1. 제1세부과제 : 수정란의 외래유전자 도입과 발현 = 26 가. 제1차년도 = 26 (1) 유전자의 확보 및 재조합 = 26 (2) 돼지 수정란의 Lac-Z 유전자의 도입과 발현 = 26 나. 제2차년도 = 27 (1) 외래유전자가 주입된 수정란으로부터 형질전환 생쥐의 생산 = 27 (2) 인간 성장호르몬 유전자의 유선조직 특이적 발현 확인 = 28 (3) PCR방법에 의한 인간 성장호르몬 유전자의 전이 및 발현 확인 = 28 다. 제3차년도 = 28 (1) 외래유전자 주입에 의한 형질전환 생쥐의 생산 = 29 (2) 산양 성장호르몬 유전자의 발현 = 29 라. 제4차년도 = 29 (1) 수정란 미세주입용 선상 DNA 작성 = 29 (2) 돼지 난자의 Microfilament와 cortical granule 세포학적 평가 = 31 2. 제2세부과제 : Transgenic 수정란의 생산 및 이용효율 제고 = 34 가. 제1차년도 = 34 (1) 난포란의 체외성숙에 미치는 시간 = 34 (2) 난포란의 체외성숙에 미치는 배양액의 효과 = 34 (3) 난포란의 체외성숙에 미치는 호르몬의 영향 = 35 (4) 난포란의 체외성숙에 미치는 난포액의 영향 = 35 (5) 난포란의 체외성숙에 미치는 배양액의 영향 = 36 (6) 배양액에 따른 체외수정 난포란의 체외배발달율 차이 = 36 (7) 체외수정 난포란의 발달에 미치는 각종 체세포의 영향 = 37 나. 제2차년도 = 38 (1) 각종 배양액내에서의 돼지 체외수정란의 배발달 = 38 (2) 아미노산과 FBS가 돼지 체외수정란의 배발달에 미치는 영향 = 38 (3) 체세포와의 공동배양 = 38 (4) LIF가 배 발달에 미치는 영향 = 39 (5) 일령별 돼지 초기배의 발달단계 = 39 다. 제3차년도 = 40 (1) 돼지 수정란의 전핵에 유전자 미세주입 및 배발달 = 40 (2) 유전자 발현 = 41 (3) 배반포의 세포수에 있어서 ICM과 Trophoblastic cell의 비교 = 41 라. 제4차년도 = 42 (1) 돼지 체외성숙란의 체외수정 = 42 (2) 돼지 수정란의 배발달 = 44 (3) Propranolol과 epinephrine이 난자내 정자 침입에 미치는 영향 = 48 (4) Propranolol과 epinephrine이 표층과립반응에 미치는 효과 = 49 3. 제3세부과제 : 이식란 이식 및 고능력 종돈 생산 = 50 가. 제1차년도 = 50 (1) 공란돈의 과배란 처리, 수란돈 발정 동기화 및 수정란 채취 = 50 나. 제2차년도 = 51 (1) 수란돈의 발정 동기화 = 51 (2) 공란돈의 과배란 처리 = 51 (3) 외과적 수정란 이식 기술 개발 = 51 다. 제3차년도 = 53 (1) 공란돈의 과배란 유기 = 53 (2) 미세주입 수정란의 이식 = 53 라. 제4차년도 = 54 (1) 미세주입 수정란의 이식 = 54 Ⅴ. 적요 = 55 Ⅵ. 종합고찰 = 57 Ⅶ. 인용문헌 = 59 |