목차정보
서명 : 저분자 가공기술을 이용한 해조류 유래 기능성 항 당뇨 식품의 실용화 기술 개발 제1장 연구개발과제의 개요 = 32 제1절 연구개발의 필요성 = 32 1. 나날이 성장하는 당뇨병 치료시장 = 32 가. 고령화와 비만이 당뇨병 확산 원인 = 32 2. 전 세계 연간 230달러의 시장, 향후 10년 동안 50% 성장 전망 = 32 제2절 연구개발의 목적 = 33 제2장 국내외 기술개발 현황 = 34 제1절 국내 기술개발 현황 = 34 제2절 국외 기술개발 현황 = 35 제3장 연구개발 수행 내용 및 결과 = 36 제1절 연구내용 = 36 1. 시료수집 = 36 2. 패 추출물의 조제 = 37 3. 시료의 저분자 가공 = 37 4. 패 추출물에 대한 항 당뇨 및 산화적 스트레스 활성분석 = 37 가. 시료준비 = 37 나. 생화학적 특성 검토 = 37 (1) 단백질 정략 (Lowry's method) = 37 (2) 당 정량 (DNS method) = 37 다. 항 당뇨 활성측정 = 38 (1) a-glucosidase 저해활성 = 38 (2) a-amylase 저해활성 = 38 (3) 식후혈당 강하효과 측정 = 38 (가) 실험동물 및 사육 = 38 (나) 실험동물의 당뇨 유발 = 38 (다) STZ 유발 당뇨 쥐에 있어서 혈당 강하 효과 측정 = 39 라. 당뇨병 세포모델을 이용한 산화스트레스 개선효과 측정 = 39 (1) 세포 배양과 처리 = 39 (2) 세포 생존율 측정 = 39 (3) 지질 과산화물 측정 = 40 (4) Intracellular ROS level 측정 = 40 (5) NO level 측정 = 41 (6) 항산화효소 활성 측정 = 41 마. 통계 분석 = 41 5. 패에서 diphlorethohydroxycarmalol의 분리 및 정제 = 41 6. 생리활성 측정 및 기능성 검증 = 42 가. 항염증 = 42 나. 항산화 활성 = 42 다. 항균활성측정 = 42 라. 항공팡이 활성 (Antifungal activity)의 측정 = 43 마. 미백활성 = 43 바. 세포독성 = 43 사. NO생성량 측정 = 44 아. Collagenase 저해 활성 측정 = 44 자. 항비만 측정 = 44 7. 항 당뇨 물질의 분리 정제 = 44 8. 항 당뇨 대상 해조류의 대량생산 기법 연구 = 45 9. 항 당뇨 활성 및 혈당강하 효과 측정 = 45 가. 재료 및 시약 = 45 나. 패로부터 DPHC 분리 = 45 다. 항 당뇨 활성 및 식후 혈당강하 효과 측정 = 46 (1) 항 당뇨 활성 = 46 (가) a-glucosidase 저해활성 = 46 (나) a-amylase 저해활성 = 46 (2) 식후혈당 강하효과 측정 = 46 (가) 실험동물 및 사육 = 46 (나) 실험동물의 당뇨 유발 = 47 (다) STZ 유발 당뇨 쥐에 있어서 혈당 강하 효과 측정 = 47 10. 당뇨병 세포모델을 이용한 산화스트레스 개선효과 측정 = 47 가. 세포 배양과 처리 = 47 나. 세표 생존율 측정 = 48 다. 지질 과산화물 측정 = 48 라. Intracellular ROS level 측정 = 48 마. NO level 측정 = 49 바. 항산화효소 활성 측정 = 49 사. 통계분석 = 49 11. 당뇨병 세포모델의 apoptosis보호 효과 측정 = 50 가. Immunocytochemistry = 50 나. Western blot 분석 = 50 다. 인슐린 분비능 측정 = 50 12. 제 2형 당뇨동물 C57BL/KsJ-db/db mice에 있어서 항당뇨 효과 측정 = 51 가. 실험동물 및 실험 디자인 = 51 나. 식이섭취량, 식이효율, 주별 체중변화에 미치는 영향 = 52 다. 주별 공복혈당 농도변화에 미치는 영향 = 52 라. HbA1c 농도에 미치는 영향 = 52 마. 혈장 글루코스 농도 측정 = 52 바. 내당능 (intraperitoneal glucose tolerance test, IPGTT) 측정 = 53 사. 혈장 인슐린 농도 측정 = 53 아. 간조직의 당대사 효소활성에 미치는 영향 = 53 (1) Glucokinase(GK) 활성도 = 53 (2) Glucose-6-Phosphatase(G6Pase) 활성도 = 53 (3) Phosphenolpyruvate carboxykinase(PEPCK) 활성도 = 53 자. 간 조직 글리코겐 함량에 미치는 영향 = 54 13. 제 2형 당뇨동물 C57BL/KsJ-db/db mice에 있어서 지질대사 개선 효과 측정 = 54 가. 혈정 지질농도에 미치는 영향 = 54 (1) 혈장 총 콜레스테롤 농도 측정 = 54 (2) 혈장 중성지질 농도 측정 = 54 (3) 혈장 유리지방산 농도 측정 = 54 (4) 혈장 HDL-콜레스테롤 농도 측정 = 54 (5) 혈장 LDL-콜레스테롤 농도 계산 = 54 나. 간조직의 지질농도에 미치는 영향 = 54 14. 제 2형 당뇨동물 C57BL/KsJ-db/db mice에 있어서 항산화 개선 효과 측정 = 55 가. 간조직 항상화 대사 관련 효소 활성도에 미치는 영향 = 55 (1) 간조직의 Superoxide dismutase (SOD) 활성도 측정 = 55 (2) 간조직의 Catalase (CAT) 활성도 측정 = 55 (3) 간조직의 Glutathione Peroxidase (GSH-Px) 활성도 측정 = 55 나. 적혈구 항산화 대사 관련 효소 활성도에 미치는 영향 = 55 (1) 적혈구의 Superoxide dismutase (SOD) 활성도 측정 = 55 (2) 적혈구의 Catalase (CAT) 활성도 측정 = 55 (3) 적혈구의 Glutathione Peroxidase (GSH-Px) 활성도 측정 = 56 다. 간 · 적혈구 지질과산화물 농도에 미치는 영향 = 56 (1) 간조직의 지질과산화물 농도 측정 = 56 (2) 적혈구의 지질과산화물 농도 측정 = 56 라. 간 · 적혈구 Glutathione 농도에 미치는 영향 = 56 (1) 간조직의 Glutathione 함량 측정 = 56 (2) 적혈구의 Glutathione 함량 측정 = 56 마. 간 · 적혈구 ROS 농도에 미치는 영향 = 57 (1) 간조직의 ROS 측정 = 57 (2) 적혈구의 ROS 측정 = 57 15. 제 2형 당뇨동물 C57BL/KsJ-db/db mice에 있어서 간 및 신장기능 측정 = 57 가. AST, ALT, Y-GTP = 57 나. Creatinine = 57 다. BUN = 57 16. 임상실험 = 57 가. 패 추출물의 섭취가 제2형 당뇨병환자의 혈당 및 인슐린 저항성에 미치는 영향 = 58 (1) 연구 설계 = 58 (2) 연구 대상 및 재료 = 58 (가) 연구대상 및 기간 = 58 (나) 실험재료 = 59 (다) 연구진행 절차 = 59 ① 연구절차 = 59 ② 패 추출물의 섭취방법 = 60 (3) 연구방법 = 60 (가) 일반 사항 및 임상적 특성 = 61 (나) 신체계측 및 혈압 측정 = 61 (다) 식이섭취 조사 = 61 (라) 혈당 및 당화혈색소 측정 = 61 (마) 혈청지질농도 측정 = 61 (바) 인슐린 분비능 측정 = 62 (사) 인슐린 저항성 측정 = 62 (아) C-reactive protein 측정 = 62 (자) 지질과산화물 함량 측정 = 62 (차) 항산화 효소 활성도 측정 = 62 ① Superoxide dismutase (SOD) 활성도 측정 = 62 ② Catalase (CAT) 활성도 측정 = 62 ③ Glutathione perozidase (GSH-px) 활성도 측정 = 63 (카) Glutathione (GSH) 함량 측정 = 63 (타) 간기능 검사 = 63 (파) 신장기능 검사 = 63 (4) 통계분석 = 63 나. 패 추출물이 식후 혈당 조절에 미치는 영향 = 64 (1) 연구설계 = 64 (2) 연구 대상 및 기간 = 64 (3) 연구 방법 = 64 (가) 일반사항 및 임상적 특성 = 64 (나) 신체 계측 및 혈압 = 64 (다) 혈당 측정 = 64 17. 생산수율과 경제성 검토 = 65 18. 응용제품의 개발 = 65 19. 대량생산공정 설계 및 개발 = 65 제2절 연구결과 = 66 1. 항 당뇨 후보물질 탐색 = 66 2. 패 추출물에 대한 항 당뇨 활성 및 산화적 스트레스개선효과 = 66 가. 항당뇨 활성 및 식후 혈당강하 효과 = 66 (1) 탄수화물 소화효소 적해활성 = 66 (가) a-glucosidase 저해활성 = 66 (나) a-amylase 저해활성 = 67 (2) 식후혈당 강하효과 = 69 나. 당뇨병 세포모델을 이용한 패 추출물의 산화스트레스 개선효과 = 72 (1) 세포 생존율 = 72 (2) 지질 과산화물 측정 = 73 (3) Intracellular ROS level 측정 = 74 (4) NO level 측정 = 76 (5) 항산화효소 활성 측정 = 78 (가) HUVECs = 78 ① Superoxide dismutase (SOD) 활성 = 78 ② Glutathione peroxidase (GSH-px) 활성 = 79 ③ Catalase 활성 = 79 3. 패로부터 항당뇨 후보물질의 분리정제 및 구조분석 = 80 4. 패로부터 분리한 diphlorethohydroxycarmalol의 항균 및 항진균 효과 = 81 5. 패로부터 분리한 diphlorethohydroxycarmalol의 항당뇨 및 생리활성 분석 = 81 5-1. 항당뇨 활성 및 식후 혈당강하 효과 = 81 1) 탄수화물 소화효소 저해활성 = 81 (1) a-glucosidase 저해활성 = 81 (2) a-amylase 저해활성 = 82 2) 식후혈당 강하효과 = 87 (1) STZ 유발 당뇨쥐에 있어서 혈당 강하 효과 = 87 5-2. 당뇨병 세포모델을 이용한 DPHC의 산화스트레스 개선효과 = 89 1) 세포 생존율 = 89 2) 지질 과산화물 측정 = 91 3) Intracellular ROS level 측정 = 92 4) NO level 측정 = 94 5) 항산화효소 활성 측정 = 95 (1) Superoxide dismutase (SOD) 활성 = 95 (2) Glutathione peroxidase (GSH-px) 활성 = 96 (3) Catalase (CAT) 활성 = 97 6. 당뇨병 세포 모델에서의 DPHC의 apoptosis 보호 효과 = 98 1) Immunocytochemistry = 98 2) Western blot 분석 = 100 (1) NF-kB 발현 = 100 (2) iNOS와 COX-2 발현 = 101 3) 인슐린 분비능 측정 = 103 7. 제 2형 당뇨동물 C57BL/KsJ-db/db mice에 있어서 항당뇨 효과 = 104 1) 식이섭취량, 식이효율, 주별 체중변화에 미치는 영향 = 104 2) 주별 공복혈당 농도변화에 미치는 영향 = 107 3) HbA1c 농도에 미치는 영향 = 107 4) 혈장 글루코스 농도 측정 = 108 5) 내당능 (intraperitoneal glucose tolerance test, IPGTT) 측정 = 109 6) 혈장 인슐린 농도 측정 = 110 7) 간조직의 당대사 효소활성에 미치는 영향 = 111 (1) Glucokinase(GK) 활성도 = 111 (2) Glucose-6-Phosphatase(G6Pase) 활성도 = 112 (3) Phosphenolpyruvate carboxykinase(PEPCK) 활성도 = 113 8) 간조직 글리코겐 함량에 미치는 영향 = 114 8. 제 2형 당뇨동물 C57BL/KsJ-db/db mice에 있어서 지질대사 개선 효과 = 115 1) 혈장 지질농도에 미치는 영향 = 115 2) 간조직의 지질농도에 미치는 영향 = 116 9. 제 2형 당뇨동물 C57BL/KsJ-db/db mice에 있어서 항산화 개선 효과 = 117 1) 간조직 항산화 대사 관련 효소 활성도에 미치는 영향 = 117 2) 적혈구 항산화 대사 관련 효소 활성도에 미치는 영향 = 117 3) 간 · 적혈구 지질과산화물 농도에 미치는 영향 = 119 4) 간 · 적혈구 Glutathione 농도에 미치는 영향 = 120 5) 간 · 적혈구 ROS 농도에 미치는 영향 = 121 10. 제 2형 당뇨동물 C57BL/KsJ-db/db mice에 있어서 간 및 신장 기능 = 122 1) AST, ALT, r-GTP = 122 2) Creatinine = 123 3) BUN = 124 11. 임상실험 결과 = 125 가. 패 추출물의 섭취가 제2형 당뇨병화자의 혈당 및 인슐린 저항성에 미치는 영향 = 125 (1) 패 추출물군과 위약군의 종질성 검증 (Before treatment)= 125 (가) 일반사항 및 임상적 특성 = 125 ① 일반사항 = 125 ② 임상적 특성 = 125 (나) 신체 계측치 및 혈압 = 127 (다) 생활 습관 및 영양소 섭취상태 = 129 ① 생활 습관 특성 = 129 ② 영양소 섭취 상태 = 129 (2) 패 추출물 섭취효과 (After treatment) = 132 (가) 신체 계측치 및 혈압 변화 = 132 (나) 영양소 섭취 상태 변화 = 133 (다) 혈당 및 당화혈색소 변화 = 135 (라) 혈청지질 변화 = 136 (마) 인슐린 분비능 변화 = 137 (바) 인슐린 저항성 변화 = 137 (사) C-reactive protein 변화 = 138 (자) 지질과산화물 변화 = 140 (차) 항산화 효소 활성 및 Glutathione 농도 변화 = 140 (카) 간기능 안전성 검증 = 143 (타) 신장기능 안전성 검증 = 143 나. 패 추출물이 식후 혈당 조절에 미치는 영향 = 144 (1) 제2형 당뇨병 환자에 있어서 패 추출물 섭취의 식후혈당강하 효과 = 144 (가) 일반사항 및 임상적 특성 = 144 (나) 신체 계측치 및 혈압 = 144 (다) 혈당에 미치는 영향 = 145 12. 생산수율과 경제성 검토 = 148 (가) 생산공정 = 148 (나) 생산수율 = 149 (다) 생산공정 설계도(10톤) = 150 (라) 생산설비단가 = 151 (마) 제조원가(패각분말 10톤/일 처리기준) = 160 (바) 경제성분석 = 161 13. 응용제품의 개발 = 162 가. 화장품 원료로서 사용 가능성 평가 = 162 (1) 미백기능성 = 162 (2) 항염증 = 162 (3) 항산화 = 164 (4) 주름억제 = 167 나. 패 원료 추출물을 이용한 아토피 및 여드름 치료용 화장품 개발 = 168 (1) 아토피성 피부질환 치료용 화장품의 개발 = 168 (2) 여드름용 제품의 개발 = 170 다. 패 원료 추출물을 이용한 항당뇨 식품개발 = 172 (1) 임상실험용 항당뇨 캡슐제조 = 172 (2) 하당뇨용 식품 샘플제조 = 172 제4장 목표달성도 및 관련분야에서 기여도 = 174 1. 연구개발 목표 및 달성도 = 174 가. 당해 연도 연구개발 목표 = 174 (1) 최종목표 = 174 (2) 당해 연도 목표 = 174 나. 연구개발 목표 및 달성도 = 174 2. 수명주기상 신청기술 또는 제품의 예상되는 위치(A-E 중 선택) 및 그 근거 = 175 3. 개발기술 동향 = 175 가. 현재 유사기술 연구개발 및 제품화 현황(기업체명과 기술명) = 175 나. 개발 완료 후 예상되는 최종제품의 형태 = 175 다. 개발기술의 예상되는 향후 동향 = 176 라. R&D개발 완료 후 단독으로 제품화 가능유무 및 핵심기술 및 주변기술 기여도 = 176 제5장 연구개발과 성과 및 성과활용 계획 = 177 1. 개발기술의 생산특성 = 177 2. 기존 자원 활용 정도 = 177 3. 최종 제품의 제품경쟁력 수준 = 177 4. 연구 성과 활용계획 = 179 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 = 183 제7장 참고문헌 = 187 |