목차정보
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서명 : 재조합 발현 기술을 이용한 다기능 어류 경구 백신 개발 제1장 연구개발과제의 개요 = 11 제2장 국내외 기술개발 현황 및 과학기술 정보 = 14 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 = 16 제1절 연구 범위 = 16 제1항 병원성 세균 및 바이러스 유전자의 분리 및 분석 = 16 제2항 병원성 목적 세균 E. tarda의 형질전환 조작 = 16 제3항 재조합 E. tarda ghost 유도 기술 개발 = 16 제4항 항원 탑재를 위한 표면발현 시스템 구축 = 16 제5항 외래 항원의 ghost 박테리아 표면 발현 기술 개발 = 16 제6항 개발 백신의 어체 방어 능력 평가 = 17 제7항 재조합 다기능 백신의 유효능 및 안전성 최적화 = 17 제8항 재조합 다기능 백신의 대량 발현, pilot scale 평가 및 현장 적용성 평가 = 17 제2절 연구 재료 및 방법 = 18 제1항 병원성 세균 및 바이러스 유전자의 분리 및 분석 = 18 제2항 병원성 목적 세균 E, tarda의 형질전환 조작 = 22 제3항 재조합 E. tarda ghost 유도 기술 개발 = 25 제4항 항원 탑재를 위한 표면발현 시스템 구축 = 32 제5항 외래 항원의 ghost 박테리아 표면 발현 기술 개발 = 36 제6항 개발 백신의 어체 방어 능력 평가 = 40 제7항 재조합 다기능 백신의 유효능 개선 및 안전성 최적화 = 47 제8항 재조합 다기능 백신의 대량 발현, 방어능 재평가 및 현장 적용성 평가 = 94 제3절 연구 결과 = 99 제1항 병원성 세균 및 바이러스 유전자의 분리 및 분석 = 99 가. Edwardsiella tarda 유전자 분리 및 분석 = 99 나. Marine Birna Virus (MABV) 유전자의 분리 및 분석 = 102 제2항 병원성 목적 세균 E. tarda의 형질전환 조작 = 106 가. 형질전환 조건 평가 = 106 나. 형질전환 벡터 backbone 평가 및 기타 조건의 최적화 = 108 다. 형질전환 지속 안전성 평가 = 109 제3항 재조합 E. tarda ghost 유도 기술 개발 = 110 가. Ghost 유도용 벡터 구축 = 110 나. 대장균에서의 ghost 발현 작동 여부 평가 = 111 다. E. tarda에서의 ghost 발현 작동 여부 평가 = 112 라. 용해 유전자 (Iysis gene) 및 발현 조절 부위의 최적화 = 112 마. 대장균 및 E. tarda에서의 Iysis 재조합 유전자 발현 특징 = 116 바. Ghost 효율 및 생존력 비교 = 119 제4항 항원 탑재를 위한 표면발현 시스템 구축 = 120 가. Inak 단백질 표면 발현 신호를 이용한 발현 벡터 = 120 나. OMP 단백질 구조를 이용한 표면 발현 벡터 = 122 다. E 단백질 작동 기작을 이용한 표면 발현 벡터 = 138 제5항 외래 단백질의 ghost 박테리아 표면 발현 기술 = 140 가. 대장균 ghost 박테리아에서 외래 단백질의 표면 발현 = 140 나. E. tarda ghost 박테리아에서 외래 단백질의 표면 발현 = 143 제6항 개발 백신의 어체 방어 능력 평가 = 144 가. 어체 면역 유도능력 및 방어능력 평가 = 144 나. 경구 백신 처리 및 방어 기능 평가 = 147 제7항 재조합 다기능 백신의 유효능 개선 및 안전성 최적화 = 153 가. 항시 고발현 유용 프로모터로의 개선 및 최적화 = 153 나. Nuclease A를 이용한 플라스미드 및 염색체 DNA 제거 기술 개발 = 163 다. 다기능 재조합 백신 발현 벡터의 최적화 구성 = 166 제8항 재조합 백신의 대량 발현, 방어 능 및 현장 적용성 평가 = 182 가. 재조합 백신의 대량 발현 최적화 = 182 나. Pilot scale 및 현장에서의 경구 백신 평가 = 190 제4장 연구개발 목표 달성도 및 관련분야 기여도 = 195 제5장 연구개발결과의 활용 계획 = 197 제6장 참고 문헌 = 202 부록 (Appendix) = 204 |
